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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)樣品為酵母菌,通過(guò)前處理設(shè)備對(duì)酵母菌樣品的研磨破碎,對(duì)其樣品進(jìn)行RNA、DNA等成分信息結(jié)構(gòu)的提取,以便后續(xù)對(duì)菌液樣品中所含有的成分信息進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè),并對(duì)其菌液的情況進(jìn)行觀察。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:全自動(dòng)液氮冷凍研磨儀JXFSTPRP-II-01
酵母菌樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1.需要提前準(zhǔn)備冷凍好的酵母菌樣品,以及實(shí)驗(yàn)設(shè)備1臺(tái)和對(duì)應(yīng)所需應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)耗材;
2.把冷凍好的酵母菌樣品與研磨珠一同放入研磨罐中,但需留出三分之一罐內(nèi)的空間;
3.把適配器放入研磨設(shè)備中進(jìn)行固定;再將裝有樣品的研磨罐放置在適配器內(nèi),但需要將其對(duì)稱放置;擰緊螺母,扣好安全鎖;
4.啟動(dòng)設(shè)備,對(duì)儀器運(yùn)轉(zhuǎn)的程序參數(shù)進(jìn)行參數(shù):頻率設(shè)置為60Hz,預(yù)冷時(shí)間30s,研磨時(shí)間30s,循環(huán)若干次;
5.待儀器程序結(jié)束后,即可獲得破碎好的酵母菌樣品,即可對(duì)其進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)樣品前處理研磨操作的注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)過(guò)后研磨罐可用酒精或在超聲波清洗機(jī)中進(jìn)行清洗消毒,烘干備用。
2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,樣品的容積不要大于三分之一,方便于樣品破碎。
酵母菌樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)效果圖:
全自動(dòng)液氮冷凍研磨儀對(duì)酵母菌樣品的前處理實(shí)驗(yàn)研磨前后效果由上圖可知,酵母菌樣品已被研磨破碎,可便于后續(xù)對(duì)樣品DNA的提取,可便于后續(xù)對(duì)酵母菌樣品中含有的成分信息進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。由于酵母很“硬",細(xì)胞壁很厚,傳統(tǒng)的酵母菌破碎方法會(huì)容易破壞樣品的生物活性,對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)DNA的提取質(zhì)量也會(huì)下降,但凈信液氮冷凍研磨儀的應(yīng)用,剛好避開(kāi)傳統(tǒng)操作的弊端,為解決這一問(wèn)題提供了有效手段。
凈信全自動(dòng)液氮冷凍研磨儀對(duì)堅(jiān)硬酵母菌細(xì)胞壁的前處理,也可以輕松應(yīng)對(duì)這一挑戰(zhàn),酵母菌細(xì)胞壁在前處理實(shí)驗(yàn)研磨操作過(guò)程中會(huì)更容易被破碎,同時(shí)保證了樣品的生物活性不受損失;這種樣品的研磨破碎方式不僅提高了破碎效率,還確保了樣品提取RNA和DNA的完整性和純度,為后續(xù)樣品分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究提供了可靠的基礎(chǔ)。