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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)樣品為小鼠肝臟細(xì)胞核,為進(jìn)一步提高樣品超聲破碎的實(shí)驗(yàn)效率和效果的準(zhǔn)確性,獲得高質(zhì)量的基因組數(shù)據(jù);此次實(shí)驗(yàn)選用凈信科研者的高通量聲波基因組剪切儀設(shè)備對(duì)樣品細(xì)胞核進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前處理。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:高通量聲波基因組剪切儀 JXDNA-500PICO
小鼠肝臟細(xì)胞核樣品前處理實(shí)驗(yàn)研磨操作過(guò)程:
1.在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,需要先將冷水機(jī)設(shè)備注滿純水;另外再做實(shí)驗(yàn)之前還需要先打開(kāi)冷水機(jī)設(shè)備,對(duì)其進(jìn)行預(yù)冷處理
2.在打開(kāi)高通量聲波基因組剪切儀的主機(jī)電源后,需要讓水保持循環(huán)狀態(tài),直到達(dá)到4℃之后方可使用
3.在實(shí)驗(yàn)設(shè)備達(dá)到預(yù)定的溫度之后,即可根據(jù)樣品的實(shí)驗(yàn)需求去對(duì)設(shè)備的程序參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)設(shè)置
4.把裝有樣品的離心管以對(duì)稱的形式放入儀器的適配器內(nèi)
5.對(duì)儀器程序的超聲模式需設(shè)為間歇超聲,超聲20s,間歇10s
6.待剪切儀使用完畢后,關(guān)閉冷水機(jī)與剪切儀電源,并將適配器擦干后安全放置
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1.每周至少換一次純水
2.儀器運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)不可用外力強(qiáng)迫適配器旋轉(zhuǎn)馬達(dá)停止
3.超聲水槽內(nèi)必須保證有水才可以啟動(dòng)超聲,不可無(wú)水超聲
4.冷水機(jī)的設(shè)定溫度是4℃,后期使用無(wú)需再次設(shè)置,打開(kāi)電源即可
5.超聲波水槽不可用尖銳物品碰觸或刮擦,不可加入高鹽或腐蝕性液體
小鼠肝臟細(xì)胞核樣品前處理實(shí)驗(yàn)超聲打斷結(jié)果:
高通量聲波基因組剪切儀對(duì)小鼠肝臟細(xì)胞核樣品的超聲實(shí)驗(yàn)處理效果由上圖可看出,實(shí)驗(yàn)設(shè)備對(duì)樣品的前處理實(shí)驗(yàn)超聲打斷結(jié)果良好,可滿足樣品的實(shí)驗(yàn)需求,能夠進(jìn)一步提高樣品細(xì)胞超聲波破碎的實(shí)驗(yàn)效率和效果的準(zhǔn)確性,能夠獲得高質(zhì)量的基因組數(shù)據(jù)。
高通量超聲波基因組剪切儀采用等溫、非接觸的方式可對(duì)樣品進(jìn)行打斷、勻漿和混合;實(shí)驗(yàn)設(shè)備主要用于細(xì)菌細(xì)胞破碎、蛋白質(zhì)抽提、二代測(cè)序樣本DNA片段化、免疫共沉淀等實(shí)驗(yàn),它具有聲波聚焦,高效率低能耗、實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好、得率高等優(yōu)勢(shì);高通量超聲波基因組剪切儀采用4℃低溫水浴超聲波,能量分布均勻,且能夠同時(shí)處理30個(gè)樣品,被廣泛用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。