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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>吉林某研究院用含待測(cè)水樣(野外采集含重金屬水樣)的培養(yǎng)液對(duì)斑馬魚胚胎進(jìn)行培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)用冷凍研磨儀對(duì)培養(yǎng)后的斑馬魚進(jìn)行研磨,提取其體內(nèi)核酸和蛋白質(zhì)與凈水培養(yǎng)的斑馬魚進(jìn)行對(duì)比,探究其基因表達(dá)差異,進(jìn)行重金屬毒性檢測(cè)評(píng)估。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:冷凍研磨儀一臺(tái),2ml*24不銹鋼適配器一個(gè)、2ml塑料研磨管若干,以及實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組斑馬魚各20條
斑馬魚樣品前處理實(shí)驗(yàn)研磨步驟:
1.把實(shí)驗(yàn)開始前準(zhǔn)備好的斑馬魚魚苗剪切成小塊狀,把剪切后小塊狀樣品加入2ml塑料離心管內(nèi),再在離心管放入適量規(guī)格的研磨珠,再加入適量的PBS緩沖液,但要記得留出管內(nèi)三分之一的空余位置
2.啟動(dòng)儀器,打開機(jī)器的操作界面將其儀器的程序參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)設(shè)置,將其溫度設(shè)置到零下50°C,研磨次數(shù)1次
3.把準(zhǔn)備好的樣品研磨管放入研磨儀的適配器內(nèi),適配器固定到研磨儀中,關(guān)閉儀器的蓋咨,開始儀器程序的運(yùn)行
4.待儀器程序運(yùn)行結(jié)束后,即可打開儀器取出樣品研磨管,即可進(jìn)行后續(xù)樣品組織的核酸與蛋白的提取純化
斑馬魚樣品前處理實(shí)驗(yàn)研磨效果:
冷凍研磨儀對(duì)斑馬魚樣品的前處理研磨效果由上圖可看出,樣品組織被均勻地混勻破碎,其樣品處理效果滿足實(shí)驗(yàn)需求,可用于后續(xù)對(duì)樣品組織的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)分析。
冷凍研磨儀在前處理研磨斑馬魚樣品時(shí)具有以下性能優(yōu)勢(shì):
1.保護(hù)生物活性:在低溫條件下研磨,能夠有效保護(hù)斑馬魚體內(nèi)易失活的生物大分子,核酸、蛋白質(zhì)、酶等,較大程度地維持其生物活性
2.防止氧化:重金屬可以誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng),使斑馬魚體內(nèi)氧化物和抗氧化酶含量增多。低溫減少了樣本中易氧化成分的變質(zhì),保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性
3.降低污染風(fēng)險(xiǎn):獨(dú)立的研磨管,避免了樣本間的交叉污染,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性
4.高效破碎:采用三維一體8字形研磨方式,快速高效率地破碎斑馬魚組織和細(xì)胞,使細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)充分釋放,提高后續(xù)實(shí)驗(yàn)的提取效率
冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN是一種快速、高效、制冷的研磨系統(tǒng)。它能在非常短的時(shí)間內(nèi)將毛發(fā)、土壤、植物和動(dòng)物的組織/器官、細(xì)菌、酵母、真菌、孢子、古生物標(biāo)本等樣品完成研磨、粉碎、混合機(jī)細(xì)胞破壁。